Высаливание и осаждение белков — как это работает и зачем нужно?
Высаливание — это осаждение белка большим количеством соли, которая отнимает у него воду. Способ мягкий и обратимый: разбавил — белок снова растворился и работает.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Растворимость и гидратная оболочка
- Раздел 1 → Денатурация
Что такое коллоидные свойства белков и как на них основан диализ?
Белки — крупные частицы: они не проходят через тонкие мембраны и «держат» воду (онкотическое давление). Диализ этим пользуется: мелкие соли уходят через мембрану, а большой белок остаётся.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Высаливание и осаждение
- Раздел 14 → Онкотическое давление и отёки
Хроматография белков — какие виды стоит знать и на чём основан каждый?
Хроматография пропускает смесь белков через колонку, и они разделяются по свойству: по размеру (гель-фильтрация), по заряду (ионообменная) или по «узнаванию» (аффинная).
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Активный центр и специфичность
- Раздел 2 → Выделение и изучение ферментов
Электрофорез белков — что он разделяет и почему так полезен в клинике?
Электрофорез гоняет белки током: у разных белков разный заряд, и они бегут с разной скоростью, разделяясь на дорожки. Белки крови дают типичную картину-«штрихкод».
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Изоэлектрическая точка и заряд
- Раздел 14 → Белки плазмы крови
Как измеряют количество белка и почему «280 нм» и биуретовая реакция всплывают постоянно?
Быстро — по свечению в УФ при 280 нм (его дают триптофан и тирозин). Химически — по цветным реакциям: биуретовая (фиолетовая с медью на пептидные связи), Лоури, Брэдфорд.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Ароматические аминокислоты
- Раздел 1 → Пептидная связь
Что такое денатурация и чем она отличается от разрушения белка?
Что происходит с яичным белком на сковороде — рвутся ли там пептидные связи?
Денатурация — это когда белок разворачивается и теряет форму (а значит, и работу), но сама нить-цепочка цела. Разрушение (гидролиз) — это когда нить режут на куски.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Третичная структура и слабые связи
- Раздел 1 → Пептидная связь
Почему белок амфотерен и что такое его изоэлектрическая точка (pI)?
Белок несёт и «плюсы», и «минусы», поэтому его общий заряд зависит от кислотности (pH). Есть точка pI — кислотность, где плюсы и минусы уравновешены и общий заряд равен нулю.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Изоэлектрическая точка аминокислот
- Раздел 1 → Электрофорез белков
Что удерживает белок растворённым в воде и почему это важно понимать?
Белок держится в воде за счёт «водяной шубы» (гидратной оболочки) и одноимённого заряда: молекулы окружены водой и отталкиваются друг от друга, поэтому не слипаются.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Изоэлектрическая точка
- Раздел 1 → Высаливание и осаждение
Как в целом выделяют и очищают белок — какая общая схема и критерии чистоты?
Схема простая: разрушить клетки → грубо разделить (центрифуга, высаливание) → тонко очистить колонками (хроматография) → проверить чистоту электрофорезом. И следить, чтобы «полезность на грамм» росла.
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Высаливание и хроматография
- Раздел 2 → Удельная активность фермента
Как разделяют белки центрифугированием и как определяют их молекулярную массу?
Центрифуга крутит пробу с огромной силой — тяжёлые частицы оседают быстрее лёгких. Так разделяют белки и оценивают их «вес» (коэффициент седиментации S).
Связи с другими темами
- Раздел 1 → Электрофорез (SDS, молекулярная масса)
- Раздел 1 → Гель-фильтрация